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膜Ⅰ型基质金属蛋白酶MT-loop区特异性亲和多肽的筛选及其在肿瘤成像中的应用

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膜Ⅰ型基质金属蛋白酶MT-loop区特异性亲和多肽的筛选及其在肿瘤成像中的应用
论文目录
 
摘要第1-7页
abstract第7-13页
第1章 绪论第13-39页
  1.1 分子影像第13-18页
    1.1.1 分子影像技术第13-16页
    1.1.2 分子影像探针第16-18页
  1.2 多肽探针第18-25页
    1.2.1 多肽探针的设计第18-19页
    1.2.2 多肽探针的靶点第19-20页
    1.2.3 多肽的筛选方法第20-22页
    1.2.4 多肽探针在成像中的应用第22-25页
  1.3 基质金属蛋白酶(MMPS)第25-29页
    1.3.1 MMPs家族简介第25页
    1.3.2 MMPs结构和分类第25-26页
    1.3.3 MMPs的表达调节第26-28页
    1.3.4 MMPs在肿瘤微环境中的作用第28-29页
  1.4 膜Ⅰ型基质金属蛋白酶(MT1-MMP)第29-39页
    1.4.1 MT1-MMP的结构和功能第29-32页
    1.4.2 MT1-MMP与肿瘤发生发展的关系第32-34页
    1.4.3 MT1-MMP抑制剂第34-36页
    1.4.4 MT-loop第36-39页
第2章 MT1-MMP催化结构域及其突变体的构建、表达、纯化和活性鉴定第39-59页
  2.1 前言第39-40页
  2.2 实验部分第40-51页
    2.2.1 实验材料第40-43页
    2.2.2 实验方法第43-51页
  2.3 实验结果第51-56页
    2.3.1 SOE-PCR突变MT-loop区第51页
    2.3.2 重组表达载体的PCR和双酶切验证第51-52页
    2.3.3 重组蛋白的表达和纯化第52-54页
    2.3.4 重组蛋白的复性第54页
    2.3.5 重组蛋白复性后的活性检测第54-56页
    2.3.6 重组蛋白的同源模建第56页
  2.4 讨论第56-58页
  2.5 小结第58-59页
第3章 MT1-MMP的MT-LOOP区特异性亲和多肽的筛选和鉴定第59-85页
  3.1 前言第59-60页
  3.2 实验部分第60-72页
    3.2.1 实验材料第60-63页
    3.2.2 实验方法第63-72页
  3.3 实验结果第72-82页
    3.3.1 噬菌体展示肽库技术筛选WT-MT1-MMP的 MT-loop区特异性亲和多肽第72-73页
    3.3.2 阳性噬菌体多肽的测序和优势多肽的鉴定第73-74页
    3.3.3 多肽的合成、纯化和鉴定第74-76页
    3.3.4 HS7和AF7p与WT-MT1-MMP的体外结合能力鉴定第76-78页
    3.3.5 Biotin-HS7 的合成鉴定第78页
    3.3.6 HS7与WT-MT1-MMP的结合特异性鉴定第78-79页
    3.3.7 分子模拟HS7和AF7p与MT1-MMP的相互作用第79-82页
  3.4 讨论第82-84页
  3.5 小结第84-85页
第4章 MT1-MMP特异性多肽探针在肿瘤成像中的应用第85-111页
  4.1 前言第85-86页
  4.2 实验部分第86-95页
    4.2.1 实验材料第86-87页
    4.2.2 实验方法第87-95页
  4.3 实验结果第95-107页
    4.3.1 鉴定不同细胞系中MT1-MMP的表达水平第95-96页
    4.3.2 HS7对MT1-MMP表达细胞的黏附作用第96-97页
    4.3.3 FITC和Cy5.5标记多肽第97-99页
    4.3.4 FITC-HS7和Cy5.5-HS7探针的生物安全性检测第99-100页
    4.3.5 FITC-HS7对MT1-MMP高表达细胞的标记以及最适工作浓度鉴定第100-101页
    4.3.6 FITC-HS7对MT1-MMP表达细胞的特异性标记第101-102页
    4.3.7 FITC-HS7的标记与MT1-MMP表达的共定位第102-103页
    4.3.8 Cy5.5-HS7探针的活体动物成像第103-105页
    4.3.9 Cy5.5-HS7探针对主要器官的组织形态影响第105-106页
    4.3.10 免疫组化分析Cy5.5-HS7探针对肿瘤的标记以及肿瘤组织MT1-MMP的表达水平第106-107页
  4.4 讨论第107-109页
  4.5 小结第109-111页
结论第111-113页
参考文献第113-123页
作者简介及科研成果第123-125页
致谢第125页

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