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基于DNA和磁性微球的酶固定化策略构建及其应用研究

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基于DNA和磁性微球的酶固定化策略构建及其应用研究
论文目录
 
学位论文数据集第1-6页
摘要第6-9页
ABSTRACT第9-13页
第一章 绪论第24-46页
    1.1 固定化酶第24-28页
        1.1.1 概述第24-25页
        1.1.2 固定化酶方法第25-28页
    1.2 DNA定向固定化技术第28-38页
        1.2.1 DNA简介第28-29页
        1.2.2 DNA定向固定化技术第29-31页
        1.2.3 DNA定向固定化技术应用第31-38页
    1.3 磁性纳米粒子第38-43页
        1.3.1 磁性纳米粒子概述第38-39页
        1.3.2 磁性纳米粒子的制备第39-40页
        1.3.3 磁性纳米粒子的表面修饰第40-42页
        1.3.4 磁性纳米粒子在生化分析中的应用第42-43页
    1.4 课题的提出与研究内容第43-46页
第二章 聚酰胺胺树枝状大分子修饰的磁球用于DNA定向固定化胰蛋白酶的研究第46-74页
    2.1 引言第46-47页
    2.2 实验部分第47-56页
        2.2.1 试剂与材料第47-49页
        2.2.2 实验仪器第49-50页
        2.2.3 固定化胰蛋白酶的制备第50-53页
        2.2.4 Bradford方法测量酶固载量第53-54页
        2.2.5 固定化酶和游离酶酶学性质考察第54-55页
            2.2.5.1 酶解条件优化第54页
            2.2.5.2 酶动力学考察第54-55页
            2.2.5.3 固定化酶可逆性考察第55页
        2.2.6 蛋白质酶切研究第55-56页
    2.3 结果与讨论第56-72页
        2.3.1 DNA定向固定胰蛋白酶的表征第56-62页
        2.3.2 DNA定向固定胰蛋白酶酶解条件优化第62-63页
        2.3.3 DNA定向固定胰蛋白酶动力学考察第63-64页
        2.3.4 不同代数PAMAM和DNA链长对酶促活性的影响第64-65页
        2.3.5 固定化酶可逆性和再生性研究第61-66页
        2.3.6 固定化酶储存稳定性和重复使用性研究第66-68页
        2.3.7 固定化酶用于蛋白质酶切分析第68-72页
    2.4 小结第72-74页
第三章 基于DNA链置换反应和功能化磁球提高固定化酶性能的研究及其应用第74-106页
    3.1 引言第74页
    3.2 实验部分第74-82页
        3.2.1 试剂与材料第74-77页
        3.2.2 实验仪器第77页
        3.2.3 DNA链置换反应固定化酶的制备第77-80页
        3.2.4 固定化酶和游离酶酶学性质考察第80-81页
            3.2.4.1 酶解条件优化第80页
            3.2.4.2 酶动力学考察第80页
            3.2.4.3 固定化酶可逆性考察第80-81页
        3.2.5 荧光标记酶第81页
        3.2.6 蛋白质酶切研究第81-82页
    3.3 结果与讨论第82-105页
        3.3.1 功能化磁性微球的制备和酶固定化第82-83页
        3.3.2 功能化磁性微球的表征第83-87页
        3.3.3 多酶连续释放和固定第87-89页
        3.3.4 固定化酶可逆性考察第89-92页
        3.3.5 固定化酶酶促活性分析第92-95页
        3.3.6 固定化酶稳定性和重复使用性分析第95-100页
        3.3.7 固定化酶蛋白质分析第100-105页
    3.4 小结第105-106页
第四章 两性离子功能化磁球用于DNA固定双酶及抑制非特异性蛋白质吸附的研究第106-132页
    4.1 引言第106页
    4.2 实验部分第106-115页
        4.2.1 试剂与材料第107-108页
        4.2.2 实验仪器第108-109页
        4.2.3 两性离子功能化磁球的制备及酶固定化第109-112页
        4.2.4 固定化酶和游离酶酶学性质考察第112-114页
            4.2.4.1 酶促活性测量方法第112-113页
            4.2.4.2 酶促条件考察第113页
            4.2.4.3 酶动力学考察第113页
            4.2.4.4 固定化酶稳定性和重复使用性考察第113-114页
        4.2.5 葡萄糖检测第114-115页
        4.2.6 荧光标记酶第115页
    4.3 结果与讨论第115-130页
        4.3.1 两性离子功能化磁球的制备及其抑制酶非特异性吸附研究第115-118页
        4.3.2 多功能磁性材料的表征第118-121页
        4.3.3 固定化双酶的制备和表征第121-123页
        4.3.4 固定化酶酶促活性分析第123-126页
        4.3.5 固定化酶稳定性和重复使用性考察第126-129页
        4.3.6 固定化酶用于葡萄糖检测第129-130页
    4.4 小结第130-132页
第五章 磁性DNA水凝胶封装双酶的制备及其应用研究第132-158页
    5.1 引言第132-133页
    5.2 实验部分第133-140页
        5.2.1 试剂与材料第133-135页
        5.2.2 实验仪器第135页
        5.2.3 磁性DNA水凝胶的制备及双酶封装第135-137页
        5.2.4 固定化酶和游离酶酶学性质考察第137-139页
            5.2.4.1 酶促活性测量方法第137-138页
            5.2.4.2 酶促条件考察第138页
            5.2.4.3 酶动力学考察第138-139页
            5.2.4.4 固定化酶稳定性和重复使用性考察第139页
        5.2.5 葡萄糖检测第139-140页
        5.2.6 荧光标记酶第140页
    5.3 结果与讨论第140-157页
        5.3.1 DNA水凝胶及酶-DNA水凝胶的制备第140-148页
        5.3.2 封装酶酶促活性分析第148-152页
        5.3.3 封装酶稳定性和重复使用性考察第152-156页
        5.3.4 封装酶用于葡萄糖检测第156-157页
    5.4 小结第157-158页
第六章 基于DNA脚手架和金属有机骨架材料(MOFs)封装酶的制备及其应用研究第158-180页
    6.1 引言第158-159页
    6.2 实验部分第159-165页
        6.2.1 试剂与材料第159-161页
        6.2.2 实验仪器第161页
        6.2.3 ZIF-8封装双酶的制备第161-163页
        6.2.4 固定化酶和游离酶酶学性质考察第163-164页
            6.2.4.1 酶促活性测量方法第163页
            6.2.4.2 酶解条件优化第163页
            6.2.4.3 酶促条件考察第163-164页
            6.2.4.4 酶动力学考察第164页
            6.2.4.5 固定化酶稳定性和重复使用性考察第164页
        6.2.5 葡萄糖检测第164-165页
        6.2.6 荧光标记酶第165页
    6.3 结果与讨论第165-178页
        6.3.1 封装酶GOx&HRP@DNA/ZIF-8的制备和表征第165-169页
        6.3.2 封装酶酶促活性分析第169-175页
        6.3.3 封装酶稳定性和重复使用性考察第175-177页
        6.3.4 封装酶用于葡萄糖检测第177-178页
    6.4 小结第178-180页
第七章 结论和创新点第180-184页
    7.1 主要结论第180-182页
    7.2 创新点第182-184页
参考文献第184-198页
研究成果及发表的学术论文第198-202页
致谢第202-204页
作者及导师简介第204-206页
附件第206-207页

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